Kompleti i zbulimit të acidit nukleik të ri Coronavirus (SARS-Cov-2).

New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit

(Fluxeherorescent RT-PCR Probe Method) Product Manual

【Product name 】Kompleti i zbulimit të acidit nukleik të ri Coronavirus (SARS-Cov-2) (metoda e provës fluoreshente RT-PCR)

【Packaging specnësecations 】25 Teste/Kit

【Intended usmosha】

Ky komplet përdoret për zbulimin cilësor të acidit nukleik nga koronavirusi i ri në tamponët nazofaringeale, tamponët orofaringeal (fyti), tamponët e hundës së përparme, tamponët me turbinat në mes, larjet e hundës dhe aspiratat e hundës nga individë të dyshuar për COVID19 nga ofruesi i tyre shëndetësor. Zbulimi i gjeneve ORF1ab dhe N të koronavirusit të ri mund të përdoret për diagnostikimin ndihmës dhe monitorimin epidemiologjik të infeksionit të ri koronavirus.

【Principles of the procedure 】

Ky komplet është projektuar për sonda specifike TaqMan dhe primerë specifikë të krijuar për sekuencat e gjenit ORF1ab dhe N të koronavirusit të ri (SARS-Cov-2). Zgjidhja e reagimit PCR përmban 3 grupe primerësh dhe sondash fluoreshente specifike për zbulimin specifik të objektivave, dhe një grup shtesë primerësh specifikë dhe sondash fluoreshente përdoret si kontrolli i brendshëm standard i kompletit për zbulimin e gjeneve endogjene të shtëpisë.

Parimi i provës është që sonda specifike fluoreshente tretet dhe degradohet nga aktiviteti ekzonukleazë i enzimës Taq në reaksionin PCR, në mënyrë që grupi fluoreshent raportues dhe grupi fluoreshent i shuar të ndahen, në mënyrë që sistemi i monitorimit të fluoreshencës të mund të marrë një fluoreshente. sinjal, dhe më pas Nëpërmjet efektit të pasurimit të amplifikimit PCR, sinjali fluoreshent i sondës arrin një vlerë të caktuar pragu-vlera Ct (Pragu i ciklit). Në rastin e mungesës së amplikonit të synuar, grupi raportues i sondës është afër grupit të shuarjes. Në këtë kohë, ndodh transferimi i energjisë së rezonancës fluoreshente dhe fluoreshenca e grupit raportues shuhet nga grupi i shuarjes, në mënyrë që sinjali fluoreshent të mos zbulohet nga instrumenti PCR fluoreshente.

Për të monitoruar përdorimin e reagentëve gjatë provës, kompleti është i pajisur me kontrolle pozitive dhe negative: kontrolli pozitiv përmban plazmidin rekombinant të vendit të synuar, dhe kontrolli negativ është uji i distiluar, i cili përdoret për monitorimin e ndotjes së mjedisit. Rekomandohet të vendosni një kontroll pozitiv dhe një kontroll negativ në të njëjtën kohë gjatë testimit.

【Main components 】

Shënim：(1) Komponentët në grupe të ndryshme të grupeve nuk mund të përzihen ose të ndërrohen.

(2) Përgatitni reagentin tuaj: Komplet për nxjerrjen e acidit nukleik.

【Storage conditions dhe expiration date 】

For BST-SARS-25:Transportoni dhe ruani në -20±5℃ për një kohë të gjatë.

For BST-SARS-DR-25:Transporti në temperaturën e dhomës. Ruani në -20±5℃ për një kohë të gjatë.

Shmangni ciklet e përsëritura të ngrirjes-shkrirjes. Periudha e vlefshmërisë është vendosur paraprakisht për 12 muaj.

Shihni etiketën për datën e prodhimit dhe përdorimit.

Pas hapjes së parë, reagenti mund të ruhet në -20±5 ° C për jo më shumë se 1 muaj ose deri në fund të periudhës së reagentit, cilado qoftë data e parë, për të shmangur cikle të përsëritura ngrirje-shkrirje dhe numrin e ngrirjes së reagentit. -ciklet e shkrirjes nuk duhet të kalojnë 6 herë.

【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.

【Sample requirements 】

1. Lloji i aplikueshëm i mostrës: Zgjidhje e ekstraktuar e acidit nukleik.

2. Ruajtja dhe transporti i mostrës: Ruani në -20±5℃ për 6 muaj. Ngrini dhe shkrini mostrat jo më shumë se 6 herë.

【Testing method】

1.Nucleic acid extraction

Zgjidhni një çantë të përshtatshme për nxjerrjen e acidit nukleik për të nxjerrë acidin nukleik viral dhe ndiqni udhëzimet përkatëse të kompletit. Rekomandohet përdorimi i një komplete për nxjerrjen dhe pastrimin e acidit nukleik të prodhuar nga Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. ose komplet ekuivalent për pastrimin e acidit nukleik.

2.  Reaction reagent preparation

2.1 For BST-SARS-25:

(1) Hiqeni përzierjen SARS-Cov-2 dhe përzierjen e enzimave, shkrijeni plotësisht në temperaturën e dhomës, përzieni tërësisht me pajisjen Vortex dhe më pas centrifugoni shkurtimisht.

(2) 16,5 uL Përzierje Enzime iu shtua 358,5 UL SARS-Cov-2 Mix dhe u përzier plotësisht për të marrë tretësirën e përzier të reagimit.

(3) Përgatitni një tub oktal të pastër 0,2 mL PCR dhe shënojeni atë me 15 uL të tretësirës së përzier të reagimit të mësipërm për pus.

(4) Shtoni 15 μL tretësirë ​​të acidit nukleik të pastruar, kontrollin pozitiv dhe kontrollin negativ dhe mbuloni me kujdes kapakun e tubit oktal.

(5) Përziejini mirë duke e përmbysur me kokë poshtë dhe centrifugoni shpejt për të koncentruar lëngun në fund të tubit.

1